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原代細(xì)胞培養(yǎng)的常見問題

 更新時(shí)間:2023-11-02    點(diǎn)擊量:581
  原代細(xì)胞培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的第一步,其步驟包括取材→分離→培養(yǎng)和維持。那么你知道原代細(xì)胞培養(yǎng)的常見問題有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!
 
  一、倍增和代數(shù)有什么區(qū)別
 
  倍增是培養(yǎng)物中細(xì)胞總數(shù)的翻倍,通常是指細(xì)胞指數(shù)或?qū)?shù)生長期。代數(shù)是指細(xì)胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過程的次數(shù),傳代培養(yǎng)的目的,是使細(xì)胞處于低密度以刺激其進(jìn)一步生長。
 
  二、接收到的凍存細(xì)胞該如何處理
 
  收到包裝箱后,立即將凍存細(xì)胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快,以避免升溫。不要將細(xì)胞儲(chǔ)存在-80℃,這樣會(huì)對(duì)細(xì)胞造成不可挽回的傷害。
 
  三、細(xì)胞培養(yǎng)過程中,多久更換一次培養(yǎng)基
 
  這取決于細(xì)胞生長的速度。一般而言2-3天更換一次培養(yǎng)基,許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
 
  注意:凍存細(xì)胞復(fù)蘇后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡的細(xì)胞。
 
  四、能否擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存原代正常人類細(xì)胞
 
  這取決于細(xì)胞的類型。一些細(xì)胞類型像神經(jīng)細(xì)胞,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和一些生長緩慢的上皮細(xì)胞,不推薦擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存。其它的細(xì)胞類型像成纖維細(xì)胞、星形細(xì)胞、腎系膜細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞等等,可以擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存。然而,需要注意的是再次凍存的過程可能導(dǎo)致細(xì)胞生長性能的改變。
 
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