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一、Wnt信號通路簡介Wnt在1982年shou次在小鼠胰腺癌中發(fā)現(xiàn)，由于此基因激活依賴小鼠乳腺癌相關(guān)病毒基因的插入，因此，當(dāng)被命名為Int-1。之后的研究表明，Int1基因在小鼠正常胚胎發(fā)育中發(fā)揮重要作用，與果蠅的無翅（Wingless）基因功能相似，均可控制胚胎的軸向發(fā)育。此后大量研究提示Int1基因在神經(jīng)系統(tǒng)胚胎發(fā)育中的重要性。因兩者基因與蛋白功能的相似性，研究者將Wingless與Int1合并，賦名為Wnt基因。人Wnt基因定位于12q13。在胚胎發(fā)育中，Wnt基因調(diào)...

ROS在細(xì)胞生命，應(yīng)激和死亡中具介導(dǎo)作用，今天讓我們來聊下ROS吧~一、ROS簡介活性氧（reactiveoxygenspecies，ROS）廣泛指代氧來源的自由基和非自由基，包含了超氧陰離子（O2-）、過氧化氫（H2O2）、羥自由基（OH-）、臭氧（O3）和單線態(tài)氧（1O2），由于它們含有不成對的電子，因而具有很高的化學(xué)反應(yīng)活性。在機(jī)體內(nèi)，ROS的主要來源之一是線粒體內(nèi)膜的呼吸鏈底物端，在線粒體中的電子傳遞鏈復(fù)合物將電子傳遞給O2的過程中，有一部分O2被還原，形成O2-或H...

一、前言細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在生命科學(xué)研究領(lǐng)域是must的。在科研上，細(xì)胞培養(yǎng)基（medium）一般都會加入血清（Serum）來補(bǔ)充蛋白質(zhì)（protein）、生長因子（growthfactor）或其他營養(yǎng)物質(zhì)（nutrients）等，大部分細(xì)胞培養(yǎng)會選擇使用胎牛血清（fetalbovineserum,FBS）。近年來也陸續(xù)有多樣的血清種類，例如：人類血小板生長因子（platelet-richplasma,PRP）、小牛血清（bovinegrowthserum,BGS）等，中科百抗自研...

一、準(zhǔn)備工作準(zhǔn)備工作對開展細(xì)胞培養(yǎng)異常重要，工作量也較大，應(yīng)給予足夠的重視，推備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或無法進(jìn)行。準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試。二、取材在無菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞（視實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ǎ?，?jīng)過一定的處理（如消化分散細(xì)胞、分離等）后接入培養(yǎng)器血中，這一過程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無取材這一過程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的shou次培養(yǎng)稱為原代...

一、工作原理RNA酶保護(hù)法（RNaseProtectionAssay，RPA，以下簡稱RPA），是近十年發(fā)展起來的一種全新的mRNA定量分析方法。基本原理：將標(biāo)記的特異RNA探針（32P或生物素）與待測的RNA樣品液相雜交，標(biāo)記的特異RNA探針按堿基互補(bǔ)的原則與目的基因特異性結(jié)合，形成雙鏈RNA；未結(jié)合的單鏈RNA經(jīng)RNA酶A或RNA酶T1消化形成寡核糖核酸，而待測目的基因與特異RNA探針結(jié)合后形成雙鏈RNA，免受RNA酶的消化，故該方法命名為RNA酶保護(hù)實(shí)驗(yàn)。二、RPA法優(yōu)...